试验设备

标准PCR实验室设备清单

发布时间:2022/8/5 19:02:16   

PCR测验室是分子诊断的底子,也是举办PCR测验的必备场面。近些年,分子诊断行业迅速进展,使得许多IVD从业者对PCR的了解又加入到了一个新的阶段,不过基于测验室的根本学识仍旧是特别紧要的一环。

PCR测验室的商量准绳准绳上理应配置4个地域:试剂积聚和打算区、标本制备区、扩增区、扩增产品解析区。依据操纵仪器的功用,地域可合适兼并。操纵准时荧光PCR仪,扩增区、扩增产品解析区可兼并;采纳模范解决、核酸索取及扩增探测为一体的主动化解析仪,则标本制备区、扩增区、扩增产品解析区可兼并。各区功用必备货物清单:01试剂积聚和打算区(1区)功用:储备试剂的制备、试剂的分装和扩增反响搀和液的打算,以及离心管、吸甲等耗费品的储备和打算。必备货物:2~8℃和-20℃如下冰箱。混匀器。微量加样器(遮蔽0.2-μl)02标本制备区(2区)功用:核酸(RNA、DNA)索取、储备及其列入至扩增反响管。关于触及临床模范的操纵,应契合生物平安二级测验室防备征战、私人防备和操纵样板的请求。必备货物:2-8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱。高速离神思。混匀器。水浴箱或加热模块。微量加样器(遮蔽0.2-μl)。生物平安柜。03扩增区(3区)功用:cDNA合成、DNA扩增及探测。必备货物:核酸扩增仪(或荧光定量PCR仪)04扩增产品解析区(4区)功用:扩增片断的进一步解析测定,如杂交、酶切电泳、变性高效液相解析、测序等。必备货物:杂交仪、电泳仪、测序仪等微量加样器(遮蔽0.2-μl)通用货物(4个区都有也许需求)可挪动紫外灯(近劳动台面)。耗费品:一次性手套、耐高压解决的离心管和加样器吸头。专用功做服和劳动鞋(套)。专用办公用品。模范管架(2区)防爆夹(2区)PCR管架(2区、通报窗)其余货物PCR测验室劳动基根源则1.加入各劳动地域理应老成遵照简单方位举办试剂积聚和打算区→标本制备区→扩增区→扩增产品解析区。2.各劳动地域必需有明了的标识,不同劳动地域内的征战、货物不得混用。3.不同的劳动地域操纵不同的劳动服(比方不同的颜色)。劳动人员离开各劳动地域时,不得将劳动服带出。4.测验室的干净理应按试剂储备和打算区→标本制备区→扩增区→扩增产品解析区的方位举办。不同的测验地域理应有其各自的干净工具以避免穿插混浊。5.劳动结尾后,必需登时对劳动区举办干净。劳动区的测验台表面理应可耐受诸如次氯酸钠的化学物资的消毒干净效用。测验台表面的紫外晖映理应便利灵验。由于紫外晖映的间隔和能量对去混浊的成果特别关键,因而可操纵可挪动紫外灯(nm波长),在劳动实行后调至测验台上60~90cm内晖映。由于扩增产品仅几百或几十碱基对(bp),对紫内线损伤不敏锐,因而紫外晖映扩增片断必需拉长晖映工夫,最佳是晖映住宿。6.测验室的平安劳动轨制或平安准则操纵程序,统统操纵契合《测验室生物平安通用请求》(GB-)。留意事变(一)试剂积聚和打算区储备试剂和用于标本制备的耗费品等材料理应直接运输至试剂储备和打算区,不能颠末扩增探测区,试剂盒中的阳性比较品及质控品不该当保管在该区,理应保管在标本解决区。(二)标本制备区由于在模范搀和、核酸纯化流程中也许会产怄气溶胶而至的混浊,可颠末在本区内设立正压前提,避免从临近区加入本区的气溶胶混浊。为避免模范间的穿插混浊,列入待测核酸后,必需盖好含反响搀和液的反响管。对具备潜在感染危险性的材料,必需在生物平安柜内开盖,并有明了的模范解决和灭活程序。(三)扩增区为避免气溶胶而至的混浊,理应尽管节减在本区内的往来。必需留意的是,统统颠末探测的反响管不得在此地域翻开。(四)扩增产品解析区核酸扩增后产品的解析办法多种百般,如膜上或微孔板或芯片上探针杂交办法(喷射性核素标识或非喷射性核素标识)、直接或酶切后琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Southern变化、核酸测序办法、质谱解析等。本区是最首要的扩增产品混浊原因,因而必需留意避免颠末本区的货物及劳动服将扩增产品带出。在操纵PCR-ELISA办法探测扩增产品时,必需操纵洗板机洗板,废液必需采集至1mol/LHCl中,而且不能在测验室内倾倒,而理应至离开PCR测验室的场合弃掉。用过的吸头也必需放至1mol/LHCl中浸泡后再放到渣滓袋中按程序解决,如燃烧。由于本区有也许会用到某些可致基因渐变和有毒物资如溴化乙锭、丙烯酰胺、甲醛或喷射性核素等,故理应留意测验人员的平安防备。

原因:辉瑞山东处境科技有限公司

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